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關(guān)于梅毒RPR檢測實(shí)驗(yàn)的幾問幾答

2020-03-03 來源:檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)  標(biāo)簽: 掌上醫(yī)生 喝茶減肥 一天瘦一斤 安全減肥 cps聯(lián)盟 美容護(hù)膚
摘要:RPR試劑檢測只適用于血清或是血漿標(biāo)本,用于腦脊液檢測的是VDRL實(shí)驗(yàn)。VDRL是唯一診斷神經(jīng)梅毒的標(biāo)準(zhǔn)方法,對CSF有較高的特異性。

RPR是檢測梅毒非特異性抗體的實(shí)驗(yàn),檢測的原理是抗原抗體凝集反應(yīng),操作簡單,反應(yīng)時間短,是區(qū)分梅毒是否為現(xiàn)正還是既往感染的重要方法。

那么看似簡單的一個實(shí)驗(yàn),從試劑的保存,到操作過程,再到后期的結(jié)果解讀,簡單里存在著復(fù)雜,下面是我工作中總結(jié)的幾點(diǎn)應(yīng)該思索和注意的問題,與大家一起學(xué)習(xí)。

1.RPR是檢測梅毒的非特異性抗體的實(shí)驗(yàn),感染梅毒后,被損害的宿主細(xì)胞及梅毒螺旋體本身釋放類脂質(zhì)物質(zhì),引起宿主產(chǎn)生類脂質(zhì)抗體,試劑抗原原液的主要成分包括什么?

心磷脂、卵磷脂、膽固醇等的混合液

2.RPR檢測試劑適用于腦脊液的標(biāo)本嗎?

RPR試劑檢測只適用于血清或是血漿標(biāo)本,用于腦脊液檢測的是VDRL實(shí)驗(yàn)。VDRL是唯一診斷神經(jīng)梅毒的標(biāo)準(zhǔn)方法,對CSF有較高的特異性。

3.乳糜血可以用于RPR的檢測嗎?

不可以。原因是大量的乳糜顆粒會與試劑中的載體碳粒粘附在一起,造成結(jié)果的假陽性,或是影響抗原抗體的結(jié)合,造成假陰性。

4.同一患者血漿標(biāo)本滴度能與血清標(biāo)本的滴度相比較嗎?

不能。必須是同樣的標(biāo)本類型才能比較滴度。一般血漿標(biāo)本的抗體滴度顯著高于血清標(biāo)本。

5.2-8度保存的血清和試劑,能否直接用于檢測?RPR充分混勻后是否可以直接滴加抗原?

2-8度保存的血清或是試劑需在室溫放置30min之后才可以使用,試劑充分混勻后,需用專用的滴針棄去第一滴,然后垂直自由落體滴加在反應(yīng)板上,一滴是17微升,不是50微升。

6.RPR定性或是定量時能用蒸餾水稀釋血清嗎?

不能。要用生理鹽水稀釋。生理鹽水屬于體液的等滲溶液,抗原抗體反應(yīng)有其最適的電解質(zhì)濃度,0.85%,接近0.9%生理鹽水濃度,如采用蒸餾水,會降低最適離子強(qiáng)度,影響抗原抗體反應(yīng)。

7.8分鐘后要不要立即判定結(jié)果?幾分鐘內(nèi)判定結(jié)果是有效的?

8分鐘后要立即判定結(jié)果,不超過3分鐘判定結(jié)果是有效的。

8.滴加抗原后能用振蕩器嗎?

不能用振蕩器。滴加抗原后,立即拿起反應(yīng)板,傾斜30°旋轉(zhuǎn)數(shù)次,讓抗原抗體樣品盡快混合,將卡片置于水平旋轉(zhuǎn)儀上,啟動儀器反應(yīng)程序(100r/min,8min.)。

9.RPR只做原倍檢測可以嗎?

不可以?,F(xiàn)在我們實(shí)驗(yàn)室都采用的是反向檢測程序,先檢測梅毒特異性抗體,如果特異性抗體陽性,然后再做RPR。所以即使RPR原倍是陰性,也要將樣品稀釋到1:16,來排除前帶效應(yīng)。結(jié)果報告到1:16陰性,說明已經(jīng)進(jìn)行稀釋,排除了前帶效應(yīng)。

10.判定結(jié)果時,是否可以借助顯微鏡觀察凝集反應(yīng)?實(shí)驗(yàn)完成后,反應(yīng)板是否同試劑盒一同放入冰箱保存?

不可以,需在明亮的光線下,肉眼觀察結(jié)果。VDRL需借助顯微鏡觀察結(jié)果。紙質(zhì)反應(yīng)板保存在干燥的環(huán)境下,不能冰箱保存。

11.判斷血清固定的的3個因素是什么[1]?

流行病學(xué)史和臨床表現(xiàn)排除復(fù)發(fā)、重新感染;連續(xù)2個隨訪周期(≥6個月)血清抗體維持在±1滴度范圍之內(nèi)的低水平(滴度≤1:8);無實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)性和方法學(xué)誤差。個別患者可終生存在血清固定。

12.RPR低滴度值是否可以排除假陽性反應(yīng)(一般滴度≤1:8)?

低滴度值不可以排除假陽性反應(yīng)。感染的初期,抗體的滴度還很低或是治療后,抗體滴度逐漸下降。

13.RPR在梅毒的3個感染期的檢測靈敏度有什么不同?

一般表現(xiàn)為一期低、二期高、三期減低的特點(diǎn)。

14.RPR陽性,并且滴度≤1:8,梅毒特異性抗體陰性,是否為梅毒感染?

一般為RPR實(shí)驗(yàn)的假陽性。常見疾病因素有SLE,麻風(fēng)病,傳單,病毒性肝炎,以及高血壓,心臟病,糖尿病,引起患者體內(nèi)心磷脂抗體的增多。生理性因素常見的有孕婦和老人體內(nèi)的一些自身抗體影響。

通過上面的幾問幾答,不知道有沒有使大家對RPR有更深的認(rèn)識呢?小小的實(shí)驗(yàn)中存在著大大學(xué)問。我們在平時工作中除了要嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)的操作規(guī)程操作外,還要多動腦思考,想一想為什么,這樣可以使我們在工作中不斷進(jìn)步,不斷提高自己的專業(yè)水平,更好的服務(wù)于臨床。

因本人水平有限,如文中有不妥之處,歡迎大家批評指正,吾不勝感激。

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